子分类:非生物素法检测系统
主要成分:试剂1:内源性过氧化物酶阻断剂
试剂2:反应增强液
试剂3:增强酶标山羊抗大鼠IgG聚合物
操作方法(仅供参考):
1、检验所需仪器、设备:移液器、恒温箱、修复仪、免疫组化笔、计时器、孵育盒、染色架、盖玻片、光学显微镜、洗瓶。
2、试剂准备:显色液需要在使用前配制。
3、操作程序:
a) 脱蜡和水化
石蜡切片置于新鲜二甲苯中,浸泡10分钟×3次;去除多余的液体后,置于无水乙醇中,浸泡3分钟×3次;去除多余的液体后,置于95%乙醇中,浸泡3分钟×2次;去除多余的液体后,置于75%乙醇中,浸泡3分钟×2次;蒸馏水冲洗1分钟,置于PBS缓冲液中。
b) 抗原修复,参见一抗说明书。
c) 阻断内源性过氧化物酶
加入适量的内源性过氧化物酶阻断剂,室温孵育10分钟;PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。
d) 滴加一抗
根据组织大小,滴加100μL或适量的一抗,37℃孵育60分钟;PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。
e) 滴加反应增强液
滴加100μL或适量的反应增强液,室温孵育20分钟;PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。
f) 滴加增强酶标山羊抗大鼠IgG聚合物
滴加100μL或适量的增强酶标山羊抗大鼠IgG聚合物,室温孵育20分钟;PBS缓冲液冲洗3分钟×3次。
g) DAB显色
加入适量新鲜配制的DAB或AEC显色液,室温孵育5~8分钟。
h) 复染
自来水冲洗,苏木素染色液孵育20秒;分化、冲洗返蓝。
i) 脱水、透明、封片
j) 阅片。
4、结果判定,染色结果须由有资质的病理医生对染色后的组织片在光学显微镜下观察并进行判读。
预期用途: 主要用于免疫组织化学染色的显色。适用于一抗来源是大鼠的抗体,由于此检测系统经小鼠血清吸收,与小鼠无交叉反应,尤其适用于检测小鼠的组织。
储存/效期: 2~8℃避光保存,不得冻存;产品有效期为12个月。
前 言:苏木素-伊红高清恒染染色系统进行染色,操作步骤简便,操作时间短。可以广泛用于组织切片染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、原位杂交等复染使用。使用本染色液后的细胞核为纯正的蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。
产 品 特 点:
1、 每套可染4000张切片;2、切片染色细腻,细微结构染色清晰;
3、本染液无沉渣;4、适合IHC复染,部分增强抗体染色效果,减低背景;
产 品 组 成:苏木素染色液、返蓝液、伊红染色液 ;各500ml/瓶;
储存及有效期:贮存条件:室温保存,有效期 24 个月。
操作步骤: (进口、国产开放型机器、手工均可使用)
1、 二甲苯3缸,每缸2min;
2、 无水乙醇3缸,每缸1min
3、 高清恒染苏木素染色液,4min;
4、 水洗10s;
5、 高清恒染返蓝液约,1min;
6、 水洗10s;
7、 高清恒染伊红染色液,30s;
(不需要水洗,直接进无水乙醇)
8、 无水乙醇3缸,每缸1min;
9、 二甲苯3缸,每缸1min
缓冲液
BSA,叠氮化钠防腐剂,BSA 稳定剂(高纯级)
形式
液体
产品类型
Antibody Diluent
数量
500 mL
运输条件
湿冰
储存于冷藏冰箱 (2–8°C) 中。
有效期:自生产之日起 18 个月
前 言:超敏型DAB显色试剂盒是应用于辣根过氧化物酶(HRP)系统的免疫组化染色。一般的 DAB 在配制后 30 分钟内使用,30 分钟后显色效应可能发生不同程度的消减,而超敏型 DAB 的稳定性显著提高,配制后的 DAB 溶液在避光保存。
产 品 组 成: 溶液A:色原
溶液B:缓冲液
储存及有效期:贮存条件:2-8℃保存,有效期 24个月。
操作步骤:在小试管中先加入溶液B(稀释液) 1ml,再加溶液A (色原)1滴(约20μl:1:50),混匀即成 DAB 显色液。染色结果为棕色。室温下染色时间约 3-10 分钟,一般在显微镜下根据颜色的发展情况掌握染色时间。
注意事项:1. DAB有潜在致突变作用,操作时应注意穿戴好防护用具,若接触到皮肤,请用大量水冲洗。
2. DAB在常温下不稳定,取用后应及时加盖密封放回冰箱,注意避光。
3. 所有试剂均应在2-8℃保存,每次取用后应及时加盖密封放回冰箱。
产品用途 该产品用于检测鼠源性和兔源性抗体。应用于免疫组织化学分析,对常规经福尔马林固定,石蜡包埋的组织和冰冻组织切片中的靶抗原进行检测,适用于在光学显微镜下观察。
产品组成 通用HRP多聚体(二抗);
储存及有效期 存放在2-8℃冰箱中,有效期为12-24个月。
操作步骤 1. 脱蜡、水化组织切片。
2. 根据所应用的一抗的要求,对组织切片进行相应的抗原修复。
3. 滴加一抗, 37℃孵育60分钟左右或4℃孵育过夜,PBS冲洗。
4. 滴加通用HRP多聚体(二抗),室温孵育8-10分钟左右,PBS冲洗。
5. 应用DAB工作液显色。
6.水冲洗、复染、脱水、封片。
注意事项 1. DAB有潜在致突变作用,操作时应注意,若接触到皮肤,请用大量水冲洗。
2. DAB在常温下不稳定,取用后应及时加盖密封放回冰箱,注意避光。
3. 所有试剂均应在2-8℃保存,每次取用后应及时加盖密封放回冰箱。
参考文献:
1、Vascular endothelial growth factor 165 inhibits profibrotic differentiation of stromal
cells via the DLL4/Notch4/smad7 pathway Lv et al. Cell Death and Disease (2019)
10:681 ;
2、Placenta-derived IL-32β activates neutrophils to promote preeclampsia development
Cellular & Molecular Immunology
3、HMGA2-induced epithelial–mesenchymal transition is reversed by let-7d in intrauterine
adhesions Molecular Human Reproduction, Vol.00, No.0, pp. 1–12, 2020
4、Worst Pattern of Perineural Invasion Redefines the Spatial Localization of Nerves in
Oral Squamous Cell Carcinoma;-published: 29 November 2021 doi: 10.3389/fonc.2021.766902
电话:025-57798001;13770584750(微信同号)
联系人:周经理